Научно-исследовательская лаборатория общей патологии

       Организационные проблемы, стоявшие перед Институтом, как и перед многими другими научными учреждениями страны, заставили в 1998-2000 гг. объединить сотрудников большинства научных лабораторий в единую Научно-исследовательскую лабораторию общей патологии (руководитель - доктор медицинских наук, профессор Владимир Сергеевич Сухоруков). Основным направлением ее научной деятельности Ученым Советом Института была определена разработка лечебно-диагностических программ на основе изучения типовых патологических процессов у детей. Несмотря на многие минусы, связанные с исчезновением известных, традиционно сложившихся лабораторий, уходом части кадров, такое объединение позволило в последние годы приложить усилия по разработке единых технологических подходов в диагностической медицине и педиатрической патологии. Так, актуализировано изучение минимально инвазивных методов диагностики, подходов в области "доклинической" диагностики, способов выявления диатезов и скрытых патологических состояний на двухуровневой основе (скрининг и углубленная диагностика). Активно изучаются особенности синдромального подхода к диагностике и изучению патогенеза, анализируются пути превращения предпатологических состояний (диатезов) в патологические (синдромы). В тоже время, объединенные в одном подразделении и представленные ниже направления - клинической патоморфологии, биохимии, иммунологии и мембранологии, продолжают свое развитие, начатое в различные годы существования Института.



Сотрудники НИЛ общей патологии

Клиническая патоморфология

Биохимия

Мембранология

Иммунология и иммунохимия

Исследования, выполняемые лабораторией


Клиническая патоморфология

       Исследования структуры органов и тканей при патологических нарушениях у детей начались в Институте со времени его организации и стали выполняться в Лаборатории возрастной морфологии. Первым руководителем морфологической лаборатории Института в 1927 году стал профессор Владимир Германович Штефко (1893 - 1945) - патологоанатом и антрополог, ученик А.И.Абрикосова и Н.В.Мельникова-Разведенкова. По сути, именно В.Г.Штефко стал одним из основоположников нового направления в отечественной педиатрии - возрастной морфологии ребенка, изучающей организм в динамике онтогенеза, раскрывающей индивидуальные и групповые различия тканевых и органных структур человека в различные периоды его развития. В.Г.Штефко использовал методы гистоархитектоники для исследования этапов формирования внутренних органов и установил явление дисхронии развития внутриорганных структур. Он выяснил, что в определенные возрастные периоды не все гистологические элементы развиваются равномерно, что имеется определенное преобладание в развитии то одних, то других образований, объяснение которому заключено в чередовании стадий дифференцировки и стадий роста гистологических элементов. Дисхрония, будучи одним из проявлений нормального гистогенеза, является зоной риска для многих патологических нарушений, проявляющихся в детском возрасте.

       Некоторые итоги первого этапа научных исследований В.Г.Штефко и его сотрудников, консультативную помощь которым оказывал также академик М.А.Скворцов, отражены в сборнике "Основы возрастной морфологии" (М., 1933), впоследствии широко цитируемом. Среди авторов статей сборника - А.И.Струков, Л.О.Вишневецкая, О.П.Григорова, В.И.Пузик. Считается, что их работы положили начало еще одному научному направлению - динамической патоморфологии.

       Трагические страницы истории лаборатории связаны с необъективной критикой в отношении последующих, в частности, антропологических, работ В.Г.Штефко. Последние касались классификации типов конституции человека, аномалий его роста и развития. Обвинения в "ложном пути" вынудили В.Г.Штефко в 1938 году прекратить работу.

       С 1938 по 1970 годы морфологической лабораторией, преобразованной в Отдел патоморфологии, заведовала профессор Любовь Осиповна Вишневецкая (бывшая с 1929 года аспирантом, а с 1932 года старшим научным сотрудником Института). Ее становление в качестве опытного и эрудированного исследователя произошло под руководством В.Г.Штефко и М.А.Скворцова. Л.О.Вишневецкая успешно разрабатывала проблемы детских инфекционных болезней. Особое внимание уделялось дифтерии (тема докторской диссертации, 1951г.), кишечным инфекциям, пневмониям, перинатальной патологии. Она раньше других патологов критиковала представление о пневмопатиях новорожденных детей, как о неинфекционном патоморфозе, выявила неблагоприятную роль внутриутробной цитомегалии в формировании врожденных пороков развития, вместе с сотрудниками продолжила исследования по возрастной морфологии ребенка. Л.О.Вишневецкая - успешный организатор московской педиатрической патологоанатомической службы и первой в Москве объединенной детской прозектуры на базе Детской клинической больницы №2 (им.Русакова). Ее учениками освоены многие новые методы гистологических исследований, включая гистохимические методики (Е.И.Албац) и электронную микроскопию (Л.М.Крылов).

       С 1970 года морфологические исследования в Институте были значительно видоизменены в связи с развитием и применением в педиатрии методов биопсий органов и тканей, с возможностью активизации клинико-морфологических разработок. Был создан Отдел клинической патоморфологии, которым с 1971 по 1998 годы руководил профессор Александр Иванович Клембовский - представитель школы академика И.В.Давыдовского. Сотрудники отдела стали изучать этапы патогенеза и разрабатывать критерии морфологической диагностики почечных, сердечнососудистых, нервномышечных, хирургических и других болезней детского возраста. Методами клинической морфологии исследовались проблемы патологии морфогенеза внутренних органов и тканей ребенка в условии наследственных и врожденных аномалий, дисфункции клеточных элементов и при наличии факторов предрасположения к хроническим заболеваниям. Необходимым условием успеха явилось расширение творческих связей между патологами и клиницистами, использование новых методических возможностей гистологического и цитологического анализа структур различного уровня организации (органного, тканевого, клеточного, ультраструктурного). Принимается во внимание известное положение академика И.В.Давыдовского (1969) о том, чтобы все отделы патологии, работающие во взаимодействии с клиническими подразделениями, не превращались "в лабораторный отсек медицины", не уходили бы от глубоких теоретических исследований и заключений в прагматизм, решали задачи и научного, и практического характера.

       Особое внимание в исследованиях было обращено на дизметаболические заболевания, возникающие вследствие митохондриальной (энергетической) недостаточности. Актуальность проблемы обусловливалась запросами клиник невропатологии, кардиологии, медицинской генетики, нефрологии.

       В процессе многолетних разработок сотрудниками подразделения получено несколько приоритетных научных результатов, практически приведших к повышению точности диагностики и прогнозирования патологии, к совершенствованию и росту эффективности методов лечения, сокращению койко-дней, увеличению сроков ремиссии. Были определены варианты и возрастные различия гломерулярных нефропатий, неоднородность их морфогенеза (А.И.Клембовский). Изучались критерии наследственного предрасположения к почечным болезням, нарушения дифференцировки почечной ткани при наследственном нефрите (А.В.Брыдун) и дисплазиях почек (О.А.Кожухова), патогенетические особенности повреждения мембран нефроцитов при токсическом и иммунном воздействиях (В.Я.Бурова, Е.И.Цветкова). Определены варианты морфологических изменений элементов аэрогематического барьера в развитии синдрома дыхательных расстройств новорожденных детей, морфологические особенности этого барьера при применении искусственного сурфактанта (Н.В.Клейменова, Л.В.Райнова), показано наличие первичных и вторичных форм цилиарной дискинезии при хронических болезнях легких со склонностью к бронхоэктазам (М.Е.Березовский, Н.В.Клейменова). Детально исследованы проявления митохондриальной недостаточности при нервно-мышечных заболеваниях и идиопатических кардиомиопатиях (В.С.Сухоруков, В.В.Невструева).

       По результатам вышеуказанных разработок А.И.Клембовским выдвинуто положение о наличии при ряде детских патологических форм "гипопластической дисплазии" - следствия торможения или искажения развития элементов органов и тканей, отчасти обратимого, требующего своевременной лечебной коррекции. Таким образом, дальнейшее развитие получили взгляды В.Г.Штефко на дисхронию внутриорганных структур.

       В последние годы уже в составе НИЛ общей патологии морфологи Института активно изучают закономерности патогенеза и разрабатывают диагностические критерии в области митохондриальной патологии (В.С. Сухоруков, В.В.Невструева, Н.В.Клейменова, Е.В.Тозлиян, Е.И.Шабельникова и др.). Основными объектом анализа при этом являются биоптаты скелетных мышц детей с различными заболеваниями (неврологическими, кардиологическими, метаболическими), биоптаты кожи, почек, гладкомышечных органов, операционный материал. Митохондриальная недостаточность впервые описана при туберозном склерозе, наследственных болезнях соединительной ткани, некоторых урологических и других заболеваниях у детей. Доказан митохондриальный характер ряда идиопатических кардиомиопатий.

       Постулировано, и впоследствии доказано, что пролиферация митохондрий является типовым адаптационным механизмом, помогающим организму компенсировать те или иные тканевые дисфункции (В.С.Сухоруков).

       Большой акцент сделан на снижение инвазивности морфологического исследования митохондриальных нарушений. С этой целью разработаны методы морфометрического исследования цитохимических препаратов периферической крови (по методу Р.П.Нарциссова) у больных с различными видами митохондриальной недостаточности (В.С.Сухоруков, Н.В.Клейменова). Внедрение таких методов повысило дифференциально-диагностические возможности морфологического изучения митохондриальной патологии, позволило значительно сократить проведение биопсий скелетной мышцы и других органов, явилось основой мониторинга лечебных мероприятий при нарушениях клеточного энергообмена у детей.

       Диагностические возможности метода существенно повышены благодаря разработке новых способов компьютерной морфометрической обработки материала (В.С.Сухоруков, Е.В.Тозлиян, Е.И.Шабельникова), что позволяет в настоящее время оценивать дифференцировать изменения цитохимических параметров при полисистемных нарушениях энергообмена и при иммуноспецифических изменениях функций лимфоцитов, при "первичных" и при "вторичных" митохондриальных заболеваниях.

       Опыт изучения параметров клеточного энергообмена при различных его нарушениях у детей, начиная с первичных митохондриальных болезней и заканчивая слабыми вторичными изменениями, позволил выявить существование различных типов индивидуального цитоэнергетического статуса организма (В.С.Сухоруков). При этом постулировано наличие скрытой формы относительной индивидуальной недостаточности, которая была названа "энергодефицитным диатезом". Высказано предположение, что энергодефицитный диатез достаточно широко распространен (не менее 10-15% от всех детей) и его наличие накладывает свои особенности на адаптационные реакции и на характер течения различных заболеваний у этих детей. Так, например, у детей с энергодефицитным диатезом возможна более частая по сравнению с другими заболеваемость респираторными болезнями, своеобразие регенераторных процессов (например, келоидный тип рубцевания ран) и другие. Наличие энергодефицитного диатеза требует коррекции терапевтических подходов к ведению таких пациентов, что доказывается эффективностью добавления энерготропных препаратов к общим схемам лечения, и определяет в разных областях клинической медицины актуальность разработок диагностических критериев и новых методов лечения больных, имеющих в качестве индивидуального фона заболевания нарушения клеточного энергообмена.

       Изучение энергодефицитного диатеза, понимание актуальности развития "доклинических" методов диагностики явились основанием для возвращения к идеям активного изучения заложенных еще Масловым и Вельтищевым представлений о различных диатезах у детей. Вновь обращено активное внимание на необходимость развития учения о конституциональных особенностях ребенка. Таким образом, и в этой области работа отдела вернулась на путь, актуальность которого была предсказана В.Г.Штефко.

       Большой фрагмент проводимой в настоящее время работы морфологов Института посвящен диагностическому анализу биопсий ряда тканей. Как с диагностической, так и с научной целью продолжается изучение почечных биоптатов у детей. Важным направлением при этом является поиск морфологических критериев наследственного нефрита (В.В.Невструева).

       Проводится морфологическая диагностика биоптатов скелетных мышц при нервно-мышечных и метаболических (в том числе, митохондриальных) заболеваниях (В.С.Сухоруков). В рамках этой работы впервые в России выявлены и изучаются редкие формы миопатий (такие как, саркотубулярная миопатия, миопатия с включениями в виде "отпечатков пальцев" и некоторые другие). Впервые в нашей стране внедрены методы иммуногистохимической оценки биоптатов скелетных мышц с выявлением таких белков как дистрофин, альфа2-ламинин, десмин (Н.В.Клейменова), имеющие принципиальное значение для дифференциальной диагностики врожденных и прогрессирующих мышечных дистрофий. Морфологические исследования являются существенным фрагментом научного направления, проводимого в комплексе с невропатологами Института (Д.А.Харламов, Д.В.Влодавец) и связанного с развитием детской миологии.

       Активно проводится морфологический анализ и других органов и систем (пищеварительный тракт, кожа и др.), биопсируемых с целью диагностики различных неонкологических заболеваний детского возраста. При этом в лаборатории используется современный набор методических средств (общегистологические методы, гистохимия, гистоферментохимия, иммуногистохимия, электронная микроскопия, компьютерная морфометрия). Постоянный поиск новых методических возможностей, стремление к внедрению современных технологических средств являются необходимыми условиями для полноценного участия наших сотрудников в становлении клинической патоморфологии как полноценного звена диагностической лабораторной медицины.


Биохимия

       Лаборатория была организована в 1927 году под руководством профессора М.М.Моделя. С 1933 года лабораторией руководила профессор И.А.Смородинцева, с 1937 года - профессор А.Н.Квятковская, а с 1947 по 1970 гг. - профессор Нина Евгеньевна Озерецковская. В этот период лаборатория занималась поиском наиболее рационального питания детей раннего возраста и больного ребенка. Изучались процессы кишечного всасывания, особенности метаболизма при мочекислом диатезе, инфекционном гепатите, ревматизме, туберкулезе у детей и другие.

      С 1970 года лаборатория биохимии была реорганизована в лабораторию патологии обмена веществ, которой руководила профессор Алла Алексеевна Ананенко, а в теоретических разработках всех изучаемых проблем непосредственное участие принимал академик Ю.Е.Вельтищев. За период до 1991 года в лаборатории вместе с ее хирургическим филиалом (руководитель - профессор Элеонора Александровна Юрьева) были определены диагностические критерии процессов пероксидации и состояния антиоксидантной защиты при заболеваниях различных органов и систем, в том числе и у детей с экстренной хирургической патологией, определены возрастные особенности про- и антиоксидантных систем организма. Разрабатывались методы диагностики генетических заболеваний: определение спектра аминокислот, жирных кислот, гормонов, ферментов, изоферментов и другие. В частности, были определены нормативные показатели содержания холестерина и полиненасыщенных жирных кислот в сыворотке крови и кале у детей от 6 месяцев до 3 лет в условиях различной зрелости функциональных систем, ответственных за обмен холестерина и полиненасыщенных жирных кислот. Было показано, что у детей с "тормозным" характером нервных процессов наиболее высоки показатели сывороточного холестерина и снижено выделение стеринов с калом, в отличие от детей со значительной двигательной активностью и быстрой выработкой условных рефлексов. Эти показатели могут использоваться в качестве критериев риска раннего атеросклероза, что важно для формирования групп детей, нуждающихся во введении в рацион растительных жиров (оливковое, соевое, подсолнечное масло в сочетании со сливочным 1:1).

      В период 1970-1991 гг. была доказана патогенетическая роль нарушений окислительных процессов при пневмониях у детей, обнаружено выраженное снижение показателей энергетического обмена, наиболее заметное при вирусных пневмониях. Отмечено, что гипоксическое состояние у детей с пневмонией характеризуется значительной активацией анаэробного гликолиза с накоплением в крови молочной и пировиноградной кислот. Большое внимание было уделено разработке доступных в клинических лабораториях методов контроля энергетического обмена, функций митохондрий, показателей насыщения кропи кислородом, особенностей его потребления в тканях: активность АТФ-аз эритроцитов, соотношение концентраций лактата и пирувата крови и мочи, содержание АТФ, АДФ, АМФ в крови и другие. Обоснована возможность и необходимость контроля нарушений энергетического обмена при различных инфекционных и экстренных заболеваниях у детей и в эксперименте: доказана эффективность АТФ, мышечного аденилового препарата, пирогенала, глютаминовой кислоты, тиоловых препаратов - унитиола, цистеина, а также димефосфона. Доказана необходимость снижения активности процессов пероксидации при гипоксических состояниях, болезнях митохондрий (А.А.Ананенко, Э.А.Юрьева, Е.Б.Спектор, Н.В.Алексеева, Н.В.Пуховская, Л.Н.Политова и другие). В этот же период изучалась роль адреналовых нарушений при различных формах острой и хронической патологии у детей (Г.Н.Титов, Н.В.Пуховская и другие). Совместно с институтом Биофизики (Пущино) разработаны критерии диагностики и терапевтическая коррекция нарушений энергетического обмена, в частности при болезнях митохондрий: янтарная, лимонная кислоты, димефосфон и другие.

      Помимо липидных медиаторов воспаления изучалось влияние нарушений системы гемостаза и фибринолиза в тканях при воспалении. Доказана провоспалительная роль повышения активности калликреиногена и содержания калликреина - системы, служащей физиологическим посредником между свертывающей и фибринолитической системами крови с одной стороны и функциональным состоянием эндотелия и тонусом сосудистой стенки - с другой. Активация калликреин-кининовой системы сопровождается гиперкоагуляцией и угнетением фибринолиза при гломерулонефрите у детей (В.И.Зверева, Ф.В.Коган, А.А.Ананенко).

      Большое внимание в 80-е годы уделялось определению патогенетической роли нарушения обмена соединительной ткани, в частности, изучалось влияние наследственного и приобретенного нарушения; обмена коллагена базальных мембран почечных клубочков (А.Я.Дьячкова, Е.И.Дайхин, А.А.Ананенко совместно с А.И.Клембовским). Обнаружено, что экскрецию оксилизилгликозидов можно использовать в качестве дифференциально-диагностического критерия наследственного и приобретенного нефрита, что имеет большое значение при прогнозировании и выборе тактики лечения нефропатий.

      С I99I года после объединения лаборатории патологии обмена веществ с ее хирургическим филиалом (руководитель - профессор Э.А.Юрьева) наиболее важным аспектом работы лаборатории было определение маркеров и информативных диагностических тестов контроля здоровья детей из регионов, пострадавших в результате аварии на Чернобыльской АЭС. В такие регионы в первые годы после аварии постоянно выезжали сотрудники лаборатории для обследования детей на местах. У детей из данных регионов установлена высокая частота уратурий (15,0-20,0%) по сравнению с детьми "чистой" зоны (1,0-5,0%). Это явилось основанием определения роли генных мутаций в длинном плече 20 хромосомы, ответственных за активность фермента гипоксантин-гуанин-фосфорибозил трансферазы (ГГФРТ), участвующего в синтезе пуриновых нуклеотидов. У детей и их родителей из загрязненных регионов было обнаружено значительное превышение числа клеток, дефицитных по ГГФРТ по сравнению с детьми из чистых регионов (Г.П.Раба, Э.А, Юрьева). Предложен метод краткосрочной культуры клеток крови (2 часа) в присутствии 6-тиогуанина, который позволяет судить о нарушении активности другого фермента синтеза пуриновых нуклеотидов - аденозиндезаминазы. Метод основан на выявлении количества клеток в S-фазе клеточного деления. При высоком риске иммунопатологических реакций резко снижается количество таких клеток. Разработан комплекс методов диагностики нарушений пуринового обмена, включающий определение активности ксантиноксидазы в сыворотке крови, количества и клиренса мочевой кислоты (кровь, моча), определение типа ацетилирования метаболитов в печени (быстрые и медленные ацетиляторы), который определяет детоксикационную функцию печени, электрофоретическое определение адениннуклеотидов в крови, а также специально разработанный метод колоночного разделения пуриновых оснований сыворотки крови (совместно с институтом Биоорганической химии им. Шемякина, патент Рос. Федерации № 2076871).

      С помощью данного комплекса методов показано наличие значительного дефицита активности ГГФРТ у детей с врожденными и наследственными кардиомиопатиями (гипоксический синдром).

      Для исследования ряда механизмов патогенеза различных заболеваний сотрудниками лаборатории патологии обмена веществ использовались экспериментальные модели этих болезней: оксалатно-калъциевый нефролитиаз и мочекаменная болезнь (Э.А.Юрьева, Н.В.Алексеева), нарушение системы сурфактанта при синдроме дыхательных расстройств (Н.А.Федюшкина, Н.В. Пуховская), гипоксический синдром и инфекционный токсикоз при пневмонии (А.А.Ананенко, Л.Н.Политова), интоксикация витамином Д и лечебный эффект янтарной кислоты (О.Н.Сафронова). Экспериментальные исследования не только позволили уточнить неизвестные ранее звенья патогенеза заболеваний, но и предложить новые информативные диагностические методы исследования и обосновать дополнительные методы лечения детей с аналогичной патологией.

      В течение нескольких десятилетий в лаборатории работали старший лаборант В.Т. Сугоняева и А.П. Елисеева. Вера Тимофеевна и Анна Петровна были надежной опорой руководителя лаборатории, много лет участвуя в проведении научных и клинических исследований. Их с благодарностью вспоминает несколько поколений научных сотрудников, врачей и аспирантов института.

      В последние годы сотрудники лаборатории участвовали в определении критериев риска и средств профилактики генетически обусловленной гиперчувствительности детского организма к ксенобиотикам: тяжелые металлы, пестициды, малые дозы радиации и их мутагенное влияние на детский организм.

      В начале 80-х годов под руководством академика Ю.Е.Вельтищева было основано новое научное направление в педиатрии - клиническая мембранология (Ю.Е.Вельтищев, Э.А.Юрьева). Был осуществлен переход от изучения органного и тканевого уровня адаптации организма ребенка на молекулярный, когда актуальной задачей научных исследований становится выявление возрастных особенностей строения и функции клеточных и внутриклеточных мембран и их роль в патологии детского возраста. Были найдены маркеры повреждения клеточных мембран факторами эндогенного и экзогенного происхождения.

      Доказано, что при многих болезнях в первую очередь страдают именно клеточные мембраны, особенно их липидные компоненты, в норме обеспечивающие непрерывность, жидкостность мембран, оптимальные условия для функционирования встроенных в мембрану ферментов, транспортных белков, и, что особенно важно, - клеточный гомеостаз кальция, поддерживая высокий градиент кальция между, внеклеточной и внутриклеточной средой. Установлена патогенетическая роль повреждения липидного слоя мембран эпителия почечной ткани при формировании дизметаболических нефропатий, кальциевого нефролитиаза, интерстициального нефрита (Э.А.Юрьева). В повреждении клеточных мембран доказана роль ферментов, гидролизующих фосфолипиды: фосфолипаз А и С, роль ксантиноксидазы - одного из основных триггерных ферментов процессов пероксидации клеточных липидов. Эти процессы сопровождаются появлением целого каскада медленно реагирующих медиаторов воспаления и анафилаксии (лизофосфолипиды, гидроперекиси, диеновые конъюгаты, лейкотриены, тромбоцитактивирующий фактор и др. (Н.А.Федюшкина, Е.С.Воздвиженская, Э.А.Юрьева, О.Н.Сафронова, Мусаев Я.-М.А. и др.).

      Параллельно поводился поиск регуляторов нарушенного обмена кальция и стабилизаторов клеточных мембран, основными из которых являлись бисфосфонаты, витамины А, Е, В, аскорбиновая кислота и другие антиоксиданты (янтарная кислота и другие.), эсенциале и т.п.

      Профессор Э.А.Юрьева и академик Ю.Е.Вельтищев явились разработчиками нового отечественного лекарственного препарата, обладающего мембраностабилизирующими и кальцийрегулирующими свойствами - ксидифона. Разрабатывались и другие фосфонаты: медифон, фосфоноуксусная кислота, которые в настоящее время применяются в виде лекарственных мазей при нарушении - обмена кальция, вирусных заболеваниях кожи. Эти разработки явились результатом совместных усилий сотрудников еще целого ряда институтов: Института элементоорганических соединений имени А.Н.Несмеянова, НИИ химреактивов, Института медико-биологических проблем, ВНИИ гигиены труда и профзаболеваний и других.

      Все периоды деятельности лаборатория была методическим центром внедрения новых способов диагностики приобретенной и генетической патологии у детей не только в России, но и в странах СНГ.

      В последние годы научный и технологический потенциал лаборатории существенно вырос за счет внедрения новых методов: тандемной хромато-масс-спектрометрии, молекулярно-генетической диагностики моногенных наследственных болезней и др. (см. приложение). Благодаря новым технологиям появилась возможность организации на базе подразделения лабораторной службы Федерального центра неонатального скрининга.


Мембранология

      По инициативе академика РАМН Ю.Е. Вельтищева под руководством профессора О.Б. Святкиной в отечественной педиатрической науке впервые получили широкое развитие исследования биофизического состояния мембран иммунокомпетентных клеток, их рецепции, роли липидных медиаторов (лейкотриенов, фактора активации тромбоцитов, гидроксиэйкозатетраеновых кислот) и цитокинов (интерлейкинов 4 и 5) в развитии аллергического воспаления у детей при различных заболеваниях.

      Работами лаборатории цитобиохимии середины 70-х годов было показано, что клеточная гиперреактивность и бета-рецепторная блокада, наблюдаемые при аллергии, связаны с измененным соотношением мембранных фосфолипидов - высоким содержанием фосфатидилхолина и минорных компонентов, включая фосфатидилинозит. В спектре жирных кислот фосфолипидов цитоплазматических мембран лейкоцитов у больных бронхиальной астмой было увеличено содержание арахидоновой и ее возможного предшественника в синтезе - линоленовой кислот (О.Б.Святкина, Л.М.Тулуевская). С расшифровкой состава медленно действующего вещества анафилаксии особенности фосфолипидного состава цитоплазматических мембран при атопической бронхиальной астме получили вполне логичное объяснение. К тому времени стало известно, что в состав медленно действующего вещества анафилаксии входят продукты метаболизма арахидоновой кислоты - лейкотриены, и синтезирующийся из фосфатидилхолина мембран фактор активации тромбоцитов. Активация рецепторного аппарата клетки связана с мембранными перестройками, повышением концентрации ионов кальция в цитоплазме и синтезом вторичного мессенджера - инозитол-трифосфата, что происходит при действии на эффекторные клетки причинно значимого аллергена. Механизмы ионного транспорта через клеточные мембраны в 70-х-80-х годах исследовались В.М. Верещагиной.

      В 1984 году на базе лаборатории цитобиохимии, руководимой Юрием Евгеньевичем Вельтищевым, была организована лаборатория медиаторов аллергии организована во главе с доктором медицинских наук, профессором, членом Европейской Академии аллергологии и иммунологии Ольгой Борисовной Святкиной. Основным направлением исследований, проводимых в лаборатории, является определение молекулярных механизмов развития аллергической патологии у детей в различные возрастные периоды.

      Как было показано совместными исследованиями лаборатории медиаторов аллергии и отделом пульмонологии, при воздействии in vitro специфического аллергена на лейкоциты детей с бронхиальной астмой высвобождаются лейкотриены. Лейкотриен D4, оказывающий самое мощное бронхоспастическое действие, определяется только в приступном периоде заболевания. В контрольной группе детей с бронхиальной астмой без выявленной сенсибилизации к данному аллергену лейкотриены в супернатанте стимулированных лейкоцитов не определяются (Б.И.Круглый, Н.Н.Погомий).

      Высвобождение лейкотриенов под действием специфического аллергена было обнаружено и при других аллергических заболеваниях: аллергическом бронхите, экзогенном аллергическом альвеолите, атопическом гастроинтестинодермальном синдроме. При этом суммарный уровень высвобождающихся лейкотриенов зависит от степени сенсибилизации организма, определяемой по методу прямой дегрануляции базофилов.(Т.В.Заболотских, Н.Н.Погомий, А.Н.Пампура).

      Было обнаружено, что лейкоциты больных аллергическими заболеваниями способны к высвобождению фактора активации тромбоцитов при стимуляции аллергеном. Этот процесс не коррелирует со степенью сенсибилизации организма. Максимальный уровень фактора активации тромбоцитов определяется в супернатанте стимулированных лейкоцитов у больных бронхиальной астмой, у детей с тяжелым течением астмы его уровень выше, чем при средней тяжести заболевания. В приступном периоде бронхиальной астмы высокий уровень фактора активации тромбоцитов обнаруживается в плазме крови. Проведенные в лаборатории исследования показали, что у детей с аллергическими заболеваниями стимулированные фактором активации тромбоцитов лейкоциты периферической крови синтезируют и высвобождают лейкотриены, уровень и спектр которых зависит от нозологической формы аллергической патологии. При этом достоверное повышение высвобождения лейкотриенов наблюдается у больных с тяжелым течением аллергического заболевания (Т.В.Заболотских, А.Т.Гусейнов, Н.Н.Погомий).

      С расшифровкой роли лейкотриенов и фактора активации тромбоцитов при аллергических заболеваниях стало возможным определение патогенетических механизмов реакций интолерантности, в том числе связанных с физическими воздействиями, и феномена псевдоаллергии. Мембранологами Института впервые было доказано, что лейкоциты больных аспириновой бронхиальной астмой высвобождают лейкотриены при стимуляции in vitro аспирином или индометацином в безбелковой среде (Б.И.Круглый).

      В исследованиях, проведенных Е.Я.Добрыниной, было обнаружено, что у больных бронхиальной астмой физического напряжения после физической нагрузки повышается высвобождение лейкотриенов из лейкоцитов под воздействием фактора активации тромбоцитов и выделение с мочой лейкотриена Е4.

      Совместными работами лаборатории мембранологии и клинических подразделений (М.В.Прыткина, Л.М.Тулуевская, Н.Н.Погомий) было установлено, что наблюдается повышение уровня высвобождения лейкотриенов под действием фактора активации тромбоцитов в условиях физиологической гипотермии (после 40 мин. инкубации при 34 С) у детей с холодовой интолерантностью. При этом при псевдоаллергическом варианте заболевания уровень высвобождаемых ЛТ как при 37 , так и при 34 С превышал таковой при атопии (наличии холодовых антител, определяемых по пассивному переносу Праустниц-Кюстнера). Аналогичная закономерность была обнаружена при исследовании высвобождения ЛТ под действием ФАТ у детей с атопическим и псевдоаллергическим вариантом атопического дерматита (А.Н.Пампура). Исследование молекулярных механизмов развития холинэргической крапивницы проводилось А.И. Амур-Сананом.

      На основании изучения способности к высвобождению биологически активных веществ из клеток in vitro разработаны новые неинвазивные методы диагностики сенсибилизации к пыльцевым и бытовым аллергенам и определение гиперреактивности на уровне различных клеточных систем больных детей к нестероидным противовоспалительным препаратам, экопатогенам, холодовому воздействию.

      Результаты разработок лаборатории позволили сформулировать концептуальную задачу по исследованию методом многофакторного анализа условий создания эффективных антиаллергических средств полифункционального действия, корригирующих функции различных клеточных популяций при аллергической патологии у детей. Предложены новые методы диагностики и лечения, направленные на предотвращение развития аллергических заболеваний в раннем возрасте, а также сокращение тяжелых форм аллергической патологии, приводящих к инвалидизации детского населения.

      Для практического здравоохранения разработаны новые методы диагностики и лечения атопической бронхиальной астмы, поллиноза, аллергического дерматореспираторного синдрома, холодовой аллергии, псевдоаллергической бронхиальной астмы, псевдоаллергических реакций и проявлений непереносимости ксенобиотиков с применением фосфоновых препаратов (димефосфона и ксидифона) и производных полиненасыщенных жирных кислот (полиена и эйконола), предложен новый способ профилактики анафилактического шока.

      Исходя из полученных результатов, начался поиск соединений, модифицирующих фосфолипидный состав цитоплазматических мембран. Для дальнейших исследований in vitro были выбраны фосфоновые соединения, встраивающиеся благодаря фосфорно-углеродной группе в фосфолипиды мембран и способные модифицировать ее текучесть - димефосфон и ксидифон. Было показано, при применении как ксидифона, так и димефосфона в течение 4 недель у детей с атопической бронхиальной астмой и поллинозом наряду с положительной динамикой клинического течения заболевания (улучшение общего состояния, снижение бронхиальной обструкции, урежение и исчезновение приступов затрудненного дыхания, предотвращение сезонных проявлений заболевания, возможность отмены кортикостероидной терапии) обнаружены ингибирование дегрануляции базофилов и высвобождения лейкотриенов под воздействием специфического аллергена in vitro, нормализация показателей текучести мембран лимфоцитов, торможение трансмембранного перемещения ионов кальция после воздействия аллергена, существенное увеличение Т-супрессорной популяции лимфоцитов периферической крови и уменьшение содержания общих IgE.

      Для снижения активности медиаторов использовались производные ?3-полиненасыщенных жирных кислот, которые вступают в конкурентные взаимоотношения с арахидоновой кислотой, частично блокируя 5-липоксигеназный путь и образуя липидные медиаторы, обладающие меньшей активностью по сравнению продуктами окисления ?6-полиненасыщенных жирных кислот.

      Месячный курс терапии эйконолом у детей с атопическим гастроинтестинодермальным синдромом приводит к достоверному снижению уровня высвобождения лейкотриена С4 и лейкотриена В4 из лейкоцитов. Показана высокая клиническая эффективность терапии эйконолом и полиеном. Также успешным было использование препаратов у детей с сочетанием атопического дерматита и псевдоаллергических реакций, в особенности, имевших частые вторичные инфицирования кожных покровов. Использование препаратов, блокирующих аллергическое воспаление, у больных с аллергическими заболеваниями имеет превентивный характер, является базисной, но не ургентной терапией.

      В настоящее время основным научным направлением в области мембранологии является разработка новых технологий для диагностики риска развития аллергических заболеваний и новых методов терапевтической коррекции у новорожденных и детей раннего возраста.


Иммунология и иммунохимия

      В 1974 году, на ранних этапах развития отечественной клинической иммунологии, в Московском НИИ педиатрии и детской хирургии МЗ РФ при активном участии академика РАМН Ю.Е. Вельтищева была создана лаборатория иммунологии и иммунохимии. До 1998 года ее возглавлял профессор Диомид Владимирович Стефани.

      В 70-х гг. основным направлением научно-исследовательской работы лаборатории являлся анализ показателей гуморального иммунитета, как одного из основных механизмов, отражающих конечную стадию реализации иммунного ответа. Одной из первых разработок, имеющих несомненную практическую ценность, стало получение моноспецифических диагностических сывороток, что в дальнейшем позволило наладить их производство. Важнейшему практическому вопросу взаимодействия гуморального иммунитета матери и плода посвящены исследования Ю.П.Резникова. Творчески развила это направление К.Н.Прозоровская, в работе которой впервые на основании комплексного динамического анализа содержания иммуноглобулинов сыворотки крови, амниотической жидкости и молозива была прогнозирована угроза выкидыша и даны рекомендации по вскармливанию детей с резус-несовместимостью. Выявление особенностей антителогенеза у детей с острым лейкозом под воздействием иммуно- и химиотерапии позволило судить о резервных возможностях иммунной системы больных и наметить пути стимуляции защитных сил организма (В.В.Смирнов).

      В 70-80 гг. большое внимание в лаборатории уделялось исследованию местного иммунитета, а именно определению факторов гуморального иммунитета в биологических жидкостях (П.И.Петкова-Переновска). В 1975-1979 гг. было проведено исследование показателей иммуноглобулинов, в том числе и секреторных, в слюне детей разного возраста. Нормативы, полученные в процессе этого фрагмента научно-исследовательской работы (Штеренгарц Б.П.) используются до настоящего времени во многих профильных лабораториях. Это исследование было удостоено серебряной медали ВДНХ.

      Следующим важнейшим фрагментом научно-исследовательского поиска стало изучение активности фагоцитарной системы, в результате чего были осуществлены модификации и внедрение методов хемотаксиса нейтрофилов периферической крови, НСТ-теста, реакции асептического воспаления in vivo (М.А.Капелько, 1981-1989). Параллельно началось исследование циркулирующих иммунных комплексов в биологических жидкостях при различных состояниях и заболеваниях у детей в возрасте от 0 до 15 лет (Т.В.Виноградова, 1983-1988). Это позволило разработать нормативный показатель содержания циркулирующих иммунных комплексов в крови, а также установить взаимосвязь между уровнем циркулирующих иммунных комплексов в сыворотке крови и активностью фагоцитарной системы, ввести критерий "емкости" фагоцитов. Способ прогнозирования внутриутробного инфицирования на основании определения циркулирующих иммунных комплексов в пуповинной крови новорожденных также был удостоен серебряной медали ВДНХ.

      В 1984-1987 гг. С.Ж.Токсомбаевой оценена динамика содержания острофазных белков при воспалительных процессах у детей.

      Практически с основания лаборатории и до середины 90-х годов активное участие в проведении научных и клинических исследований лаборатории принимала лаборант Л.С. Митрохина.

      С 90-х годов получило развитие новое направление иммунологии, определившее основной профиль работы лаборатории - функциональная клиническая иммунология.

      Первыми этапами на пути создания концепции "клинической функциональной иммунологии" явилось изучение кинетики иммунологических реакций, в частности, комплемента (Е.С.Леонова, Т.В.Косенкова, 80-90-е гг.) и оценка реакции клеток иммунной системы на экзогенные воздействия in vitro. Начало исследованиям этого направления положили разработанные в лаборатории модификации метода оценки реактивности иммунокомпетентных клеток in vitro в "нагрузочных" тестах. Было показано (Д.В.Стефани, Т.В.Косенкова, 1990), что под воздействием фармакологических или термических "нагрузок" экспрессия рецепторов лимфоцитов может изменяться в соответствии с тремя типами реакции: увеличиваться, уменьшаться или сохраняться на прежнем уровне.

      В дальнейшем проведенные исследования (И.Л.Алимова, Т.А.Маркова, И.Я.Миху, Г.А.Забродина, И.М.Мельникова и др.) показали возможность использования разработанных и адаптированных к применению в педиатрической практике модификаций "нагрузочных" тестов для решения следующих практических задач: 1) для дифференциальной диагностики ряда хронических воспалительных и аллергических заболеваний, а также при оценке эффективности лечения; 2) для оценки индивидуальной чувствительности клеток системного и местного иммунитета к экзогенным повреждающим факторам in vitro; 3) для определения оптимальных диапазонов концентраций фармакологических препаратов. Разработанные методы используются и в настоящее время при реализации программы оптимизации вакцинации детей и прогнозирования развития ряда заболеваний у новорожденных.

      Под руководством Д.В.Стефани (1998 г.) были окончательно сформулированы положения концепции функциональной клинической иммунологии: 1) любая реакция иммунокомпетентной клетки на внешние воздействия является проявлением ее функции; 2) диапазон функциональной реактивности иммуноцитов определяется индивидуальными особенностями; 3) в зависимости от функциональных резервов выявляются 3 типа реакций иммуноцитов на внешние воздействия; 4) существует зависимость между типом реакции иммуноцитов и предрасположенностью к развитию различных патологических процессов (аллергических или хронических воспалительных).

      Однако, поскольку предложенный метод оценки состояния иммунокомпетентных клеток основывается на изменении экспрессии рецепторов, и, строго говоря, не отражает конечного результата иммунной реакции, следующим этапом исследования явилось обоснование дополнительных подходов к оценке функционального состояния иммунокомпетентных клеток и баланса регуляции иммунозависимых процессов. Попыткой оценки механизмов, регулирующих антителогенез, явилась разработка метода оценки баланса регулирующих систем иммунитета (Д.В.Стефани, Г.П.Раба, 1993 г.). Была создана модель культуры клеток, используемая в качестве мишени для действия гуморальных факторов, регулирующих синтез антител.

      Следующим этапом явилась разработка микромодификаций методов оценки функциональной активности иммунокомпетентных клеток в лимфоидной ткани, позволяющих ускорить процесс получения информации и сократить количество материала, необходимого для исследования, по сравнению с классическими аналогами (Д.В.Стефани, Е.А.Ружицкая, Л.А. Данилов, Х.М.Маккаев, 1993-1995).

      Разработка методов функциональной оценки иммуноцитов и анализ полученных с их помощью результатов вызвала необходимость создания способов управления цитоскелет-зависимыми процессами в иммунокомпетентных клетках. Исследования, проведенные in vitro и in vivo показали, что препараты, представляющие собой производные индола, блокируют процесс полимеризации актина и, таким образом подавляют функциональную активность цитоскелета. Продемонстрировано, что вновь синтезированные производные индола, цитотоксичность которого ниже, чем у цитохалазинов, ингибирует процесс экзоцитоза важнейших медиаторов аллергии - гистамина и серотонина - клетками периферической крови (Д.В.Стефани, А.В.Семенов, С.К.Зазулин, 1988-1997).

      В конце 90-х гг. в лаборатории начались исследования по изучению состояния рецепторного аппарата иммуноцитов. Был разработан новый метод оценки лиганд-зависимого перераспределения иммуноглобулиновых рецепторов В-лимфоцитов (Т.В.Виноградова, Д.В.Стефани, 1995 г.), включающий регистрацию фазовых состояний процесса. В результате исследования установлено наличие 2-х путей перераспределения иммуноглобулиновых рецепторов на поверхности мембраны В-лимфоцитов, существенно различающихся в зависимости от вида патологии. Для количественной характеристики особенностей лиганд-зависимого перераспределения рецепторов как в норме, так и при патологии, выяснения преобладания того или иного пути у конкретного индивидуума был введен коэффициент, позволяющий диагностировать у больных наличие атопического процесса. В дальнейшем был разработан количественный показатель, характеризующий степень выраженности сенсибилизации организма. Данный метод используется в клиниках и до настоящего времени, что способствуя выявлению атопических механизмов в патогенезе различных заболеваний (аллергические заболевания, почечные и бронхолегочные заболевания, заболевания ЛОР-органов, парциальные и генерализованные формы эпилепсии и т.д.). Исследования процесса лиганд-зависимого перераспределения иммуноглобулиновых рецепторов В-лимфоцитов, проведенные у детей, подвергшихся воздействию радиации, и детей, родившихся в семьях участников ликвидации последствий аварии на ЧАЭС, выявили замедление его динамики, что указывало на изменение функционального состояния иммунокомпетентных клеток, одной из причин которых могла быть полисистемная биоэнергетическая недостаточность. Параллельные исследования процесса перераспределения активированных лигандом рецепторов и цитохимический анализ активности митохондриальных ферментов (Т.В.Виноградова, В.С.Сухоруков, Н.В.Клейменова) у больных с различными формами митохондриальной недостаточности подтвердили это предположение. На основании полученных результатов был разработан коэффициент для количественной оценки скорости процесса лиганд-зависимого перераспределения иммуноглобулиновых рецепторов В-лимфоцитов.

      Учитывая, что частым недостатком иммунологического обследования детей является фрагментарность полученной информации, возникла необходимость разработки упорядоченного алгоритма исследования иммунологических показателей, позволяющей с максимальной объективностью судить о функционировании иммунной системы в целом. В результате проведенных исследований была разработана и предложена схема иммунологического обследования детей, включающая методы, выбранные согласно принципиальным требованиям к исследованиям, проводимым в педиатрии: а) информативность; б) использование щадящих, не требующих больших затрат биологического материала методов (преимущественно, микрометодов); в) возможность индивидуальной интерпретации полученных результатов; г) обязательное параллельное исследование количественных и функциональных показателей иммунокомпетентных клеток; д) параллельное исследование системного и местного иммунитета; е) экономичность.

      Важнейшим достижением в области детской клинической иммунологии явился выход в свет монографий Д.В. Стефани и Ю.Е. Вельтищева "Клиническая иммунология детского возраста" (1977) и "Клиническая иммунология и иммунопатология детского возраста" (1996).

      После проведенной в 1998-2000 реорганизации и образования НИЛ общей патологии исследования в области функциональной иммунологии продолжились. В период с 2000 по 2006 гг. сотрудниками лаборатории проводились исследования по нескольким перспективным направлениям.

      Проведена оценка динамики иммунограмм детей с почечной патологией при применении иммунотропных препаратов (кортикостероидных, цитостатических, внутривенного иммуноглобулина).

      Проведено исследование иммунограмм у больных с аллергией в динамике специфической гипосенсибилизации и при применении иммуномодулирующих средств.

      Дана характеристика параметров процесса лиганд-зависимого перераспределения иммуноглобулиновых рецепторов В-лимфоцитов у детей с аллергическими заболеваниями, первичной и вторичной митохондриальной недостаточностью, судорожным синдромом, ЛОР-патологией, у детей с последствиями воздействия радионуклидов, у часто болеющих детей.

      Выявлены особенности Т- и В-лимфоцитов, особенности количественного соотношения мононуклеаров и их функций у больных с гастродуоденитом, ассоциированным с вирусом Эпштейн-Барра.

      Показана зависимость функциональной активности иммунокомпетентных клеток и клеточного энергообмена иммуноцитов при аллергических и хронических воспалительных заболеваниях. Установлено наличие дисфункции процессов энергообмена у детей дошкольного и младшего школьного возраста групп часто болеющих детей и у детей с типично протекающим атопическим дерматитом.

      Выявлены нарушения фагоцитоза у детей с парциальными и генерализованными формами эпилепсии.

      Показана гетерогенность функциональной активности фагоцитирующих нейтрофилов у детей с гипертрофией миндалин в зависимости от степени их гипертрофии и фазы заболевания.

      Показана гетерогенность эозинофилов периферической крови и их легкой фракции по уровню энергетического обмена у больных с аллергическими заболеваниями.

      Разработана методика исследования функции мерцательного эпителия слизистой оболочки носа и бронхов.

      В настоящее время сотрудниками лаборатории продолжаются исследования, направленные на совершествование диагностики состояния иммунной системы ребенка и интерпретации иммунограмм в детском возрасте.

      Процессы онтогенеза, протекающие антенатально и в детском возрасте, чрезвычайно чувствительны к неблагоприятным экологическим условиям, отличаются особенностями метаболических процессов и проявлений наследственных нарушений, своеобразием течения типовых патологических реакций и инфекционных процессов, диктуют необходимость специальных подходов к изучению патогенеза и разработке методов диагностики. Проблемы при этом не ограничиваются количественными вариациями возрастных показателей. Речь идет о постоянной смене акцентов диагностической медицины с учетом смены возрастных состояний детского организма, каждое из которых представляет целостно функционирующую систему с динамически изменяющимся соотношением отдельных компонентов. Именно в таком контексте решали и решают свои задачи сотрудники научных лабораторий Института.

      Несмотря на достижения современной диагностической медицины нельзя не отметить ограниченность методологических принципов в организации научных разработок в области диагностики и внедрения в практику. Изучение новых диагностических технологий, число которых стремительно растет и сегодня исчисляется десятками тысяч, использование их в клинике происходит подчас хаотично, без должного информационного подкрепления, с излишними трудовыми и финансовыми затратами. Часто мы видим недостаточное использование эффективных подходов или переоценку неэффективных.

      Понимание того, что научные разработки, как и внедрение в практику новых методов, должны строится на упорядоченной основе, без случайностей и хаоса, оказывает все большее влияние на формирование плана работы научных лабораторий. Организация методологического фундамента научного процесса становится одной из основных целей работ в области лабораторной медицины.

      Решение этих проблем лежит в области формирования стратегии диагностического процесса, принципиальной основой которой является стремление к:

  • патогенетической обоснованности;
  • максимально высокой специфичности и чувствительности методов;
  • комплексности (уход от переоценки отдельных подходов и параметров);
  • минимальной инвазивности;
  • дешевизне;
  • быстроте выполнения (анализ у постели больного).

      Формирование единой стратегии диагностического процесса затрудняется технологическими различиями его главных составляющих: морфологического, биохимического, иммунологического и других направлений диагностики. Однако вышеприведенные принципы едины для всех этих направлений, поэтому актуальной является задача разработки методологический инструментарий для создания единой технологической базы диагностического процесса (по примеру организационно выделенного в некоторых странах звена "клинической патологии").


Сотрудники
научно - исследовательской лаборатории общей патологии:

НИЛ ОБЩЕЙ ПАТОЛОГИИ

Сухоруков В.С.

Сухоруков Владимир Сергеевич - доктор медицинских наук, профессор, заведующий НИЛ общей патологии, профессор кафедры гистологии РНИМУ им. Н.И. Пирогова. Ответственный секретарь журнала "Российский вестник перинатологии и педиатрии". Заместитель главного редактора журнала "Клинико-лабораторный консилиум". Член редколлегии журнала "Нервномышечные болезни". Председатель комиссии "Митохондриальная патология" (ранее - комиссии "Гипоксия: механизмы, адаптация, коррекция") при Межведомственном научном совете по проблемам гипоксии.
В.С. Сухоруков родился в 1957 году. В 1983 году окончил педиатрический факультет 2-го Московского медицинского института (ныне РНИМУ им. Н.И. Пирогова). Там же прошел обучение в аспирантуре, изучая межклеточные взаимодействия соматических и половых клеток, а также регенераторный потенциал герминативного тканевого ростка (кандидат медицинских наук по специальности "гистология и эмбриология" с 1988 года).
С 1994 года работает в Московском НИИ педиатрии и детской хирургии. Здесь основной темой его исследований стали: диагностика нервно-мышечных заболеваний, нарушения клеточного энергообмена, лабораторная диагностика ряда наследственных болезней у детей (доктор медицинских наук по специальностям "патологическая анатомия" и "педиатрия" с 1998 года; профессор по специальности "клиническая лабораторная диагностика" с 2004 года). В 2003 году был назначен главным специалистом Минздрава по лабораторной диагностике в педиатрии.
Среди основных научных достижений В.С. Сухорукова: выявление стимулирующего эффекта низкоинтенсивного лазерного излучения на регенерацию герминативных клеток, описание патоморфологического комплекса изменений скелетной мышечной ткани при митохондриальных болезнях у детей, разработка методических подходов к лабораторной диагностике первичных и вторичных нарушений клеточного энергообмена, описание феномена "энергодефицитного диатеза", разработка гипотезы об адаптационном и компенсаторном потенциале пролиферирующих митохондрий у человека.
Опубликовал около 340 работ (более 50 - в зарубежной печати). За последние 5 лет опубликовано 115 работ.
Индекс Хирша - 7.

Э.А. Юрьева

Юрьева Элеонора Александровна - главный научный сотрудник, доктор медицинских наук, профессор.
Автор более 20 авторских свидетельств и патентов на изобретения, многие из которых отмечены медалями ВДНХ (награды - изобретатель СССР).
В институте работает с 1969 года, руководила лабораторией клинической хирургической биохимии, затем лабораторией патологии обмена веществ, в НИЛ общей патологии работает со дня основания. Ее кандидатская диссертация была посвящена вопросам диетотерапии при заболеваниях почек у детей (1971), докторская (1979) - роли повреждения цитомембран в патогенезе заболеваний почек у детей.
Областью научных интересов являются нефрология, биохимия, фармакология. Э.А.Юрьева высокопрофессиональный специалист в области клинической биохимии детского возраста, большое внимание уделяет изучению новых механизмов этиологии и патогенеза соматических и наследственных заболеваний у детей. Совместно с академиком РАМН Ю.Е.Вельтищевым Э.А.Юрьева была инициатором, а затем ответственным исполнителем разработки отечественного кальцийрегулирующего препарата ксидифона, который разрабатывался коллективом медиков и химиков ряда научно-исследовательских институтов Москвы. Препарат в настоящее время с успехом используется для лечения мочекаменной болезни, остеопорозов, патологической кальцификации мягких тканей и др.
Под руководством Э.А. Юрьевой разработан ряд оригинальных биохимических методов, давших возможность усовершенствовать диагностику заболеваний детского возраста. Э.А. Юрьева проводит большую работу по подготовке научных кадров, повышению квалификации врачей в теоретических областях педиатрии и клинической биохимии. Под руководством Э.А. Юрьевой выполнено и защищено 12 кандидатских диссертаций.
Монографии - "Наследственные и врожденные нефропатии у детей", "Справочник по функциональной диагностике в педиатрии", "Бисфосфонаты", "Детская нефрология" (в соавт.), "Справочник детского нефролога" "Фиброзирующие процессы", "Справочник детского гастроэнтеролога". За последние 5 лет опубликовано 40 печатных работ.
Индекс Хирша - 4.

В.В. Невструева

Невструева Вера Викторовна - ведущий научный сотрудник, кандидат медицинских наук.
В институте работает с 1994 года. До этого работала в МНИИГ им Ф.Ф. Эрисмана в патоморфологической лаборатории научным сотрудником, а затем преподавателем кафедры цитологии, гистологии и эмбриологии педиатрического факультета РГМУ им. Н.И. Пирогова.
Владеет методами исследования: светооптический, гистохимический, иммуногистохимический и электронно-микроскопический анализ.
Имеет более 100 печатных работ, как в отечественных журналах так и за рубежом, большая часть которых посвящена изучению процессов спермато- и спермиогенеза в норме и при нарушении механизмов нервной и гормональной регуляции и исследованию биоптатов почек у детей раннего возраста с различными нефрологическими заболеваниями. Кроме того работала и работает в комплексе с другими специалистами (клиницистами): пульмонологами, гастроэнтерологами, кардиологами, невропатологами, урологами.

И.С. Мамедов

Мамедов Ильгар Салехович - ведущий научный сотрудник, к.м.н.
В 1994 году защитил диссертацию на тему "Фотобиологические эффекты фурокумаринов".
Область научных интересов: лабораторная диагностика важнейших маркеров метаболизма человека, биохимия, хроматомасс-спектрометрия, генетика

Основные темы научных исследований:

  • Разработка диагностических маркеров наследственных заболеваний у детей на основе изучения индивидуальных особенностей метаболизма;
  • Диагностика наследственных нарушений обмена пуринов и пиримидинов с использованием метода высокоэффективной жидкостной хроматографии масс-спектрометрии;
  • Изучение роли митохондриальных нарушений в развитии детских болезней.

Индекс Хирша - 3.

Т.В. Виноградова

Виноградова Татьяна Владимировна - ведущий научный сотрудник, кандидат медицинских наук, ученое звание "Старший научный сотрудник".
В МНИИ педиатрии и детской хирургии работает с 1973 года, сначала в лаборатории цитобиохимии в должности младшего научного сотрудника, с 1980 г - в лаборатории иммунологии и иммунохимии (1980-1988 гг. - в должности младшего научного сотрудника, с 1988 - старшего научного сотрудника), с 2000 - ведущий научный сотрудник научно-исследовательской лаборатории общей патологии.
Диссертация на тему: "Зависимость уровней циркулирующих иммунных комплексов от функционального состояния фагоцитирующей системы" по специальности - аллергология и иммунология.
Изобретения: "Способ прогнозирования развития инфекционных заболеваний в неонатальном периоде" (авт.свидетельство N 1291880), (серебряная медаль ВДНХ СССР - удостоверение N 37694); два патента на изобретения: "Способ исследования процесса мембранной сборки иммуноглобулиновых рецепторов В-лимфоцитов" - Российский патент N 2029952; "Способ диагностики заболеваний аллергического генеза у детей" - Российский патент N 2029937.
Область научных интересов: изучение функционального состояния иммунокомпетентных клеток (В-лимфоциты) при различных заболеваниях; изучение состояния биоэнергетического обеспечения клеток иммунной системы у детей с транзиторной и вторичной митохондриальной недостаточностью; исследование уровней гомоцистеина в биологический жидкостях (сыворотка крови, моча) у детей с хроническими болезнями почек и заболеваниях сердечно-сосудистой системы; исследование цитокинового статуса, а также антимикробных белков в биологический жидкостях (сыворотка крови, моча, слюна) у детей при ХБП и с аллергическими заболеваниями, в том числе и с эозинофилией, с целью выявления и уточнения роли дополнительных иммунных механизмов в патогенезе данных заболеваний, доклинической диагностики различных заболеваний.
Владеет иммунологическими и аллергологическими методами исследования (всего более 30), в том числе стандартными методами иммуноферментного анализа, а также с использованием технологии иммуноферментного анализ на микрочастицах и флюоресцентно-поляризационного иммуноанализа в автоматическом режиме на приборе IМх фирмы АВВОТТ, иммунофлюоресцентной микроскопией.
За последние 5 лет опубликовано 37 печатных работ, в том числе, 5 глав в монографиях, 6 статей - в центральной печати, 5 - за рубежом.

Е.А. Ружицкая

Ружицкая Елена Апполосовна - ведущий научный сотрудник, кандидат медицинских наук.
Работает в институте с 1984 г, в лаборатории клинической иммунологии и иммунохимии - с 1984 г., в НИЛ общей патологии - с 1998 г.
Диссертационная работа посвящена количественному определению субпопуляционного состава лимфоцитов периферической крови.
За последние 5 лет опубликовала 43 печатные работы, соавтор 3 изобретений.
Области научных интересов - исследование спектра цитокинов при аллергических заболеваниях и эозинофилии, цилиарная дискинезия, персистирующие инфекции.
Владеет более чем 50 методами (иммунологическими и клинической лабораторной диагностики, в том числе такими современными методиками, как ПЦР, ИФА, компьютерная морфометрия.

Е.В. Тозлиян

Тозлиян Елена Васильевна - ведущий научный сотрудник, кандидат медицинских наук, педиатр-эндокринолог, генетик.
Владеет методами цитохимического и морфометрического анализа.
С 1999г. работает в МНИИ педиатрии и детской хирургии МЗ РФ. В 2003г. защитила кандидатскую диссертацию на тему: "Клиническое значение митохондриальных нарушений у детей с недифференцированными формами задержки нервно-психического развития".
Е.В. Тозлиян опубликовала 55 печатных работ, зарегистрирован патент "Способ прогнозирования митохондриальных заболеваний у детей с недифференцированными формами задержки нервно-психического и физического развития (варианты). " Тозлиян Е.В., Сухорукова В.С. и др. (от 09.06.08., входящий № 027614, регистрационный № 2008122952).
Она регулярно выступает на Российских и региональных съездах и конференциях, рецензирует статьи и диссертации.

Основные научные направления:

  • изучение эндокринных нарушений у детей с нервномышечными заболеваниями;
  • цитохимические и морфометрические исследования процессов энергетического метаболизма у детей с различными заболеваниями;
  • научный поиск предикторов развития различных заболеваний;
  • выявление доклинических маркеров метаболических нарушений у детей, страдающих избыточной массой тела;
  • разработка профилактических мероприятий, направленных на предотвращение развития метаболического синдрома у детей, и усовершенствование способов фармакологической коррекции выявленных метаболических нарушений.

Индекс Хирша - 2.

А.К. Берешева

Берешева Альфия Камиловна - ведущий научный сотрудник, кандидат биологических наук по специальности "Генетика - 03.00.15", ученое звание - "Старший научный сотрудник". Стаж работы в институте 22 года.
Берешева А.К. - соавтор более 100 научных работ; 8 глав в монографиях, одна из которых является пособием для педиатров; технических условий (ТУ 9398-001-01895269-2005 от 28.06.05) и инструкции набора хромосомоспецифичных ДНК зондов для определения хромосом 13,18, 21, X и Y, сертифицированных в Минздраве России; соавтор работы, выдвинутой на соискание премии Правительства Российской Федерации в области науки и техники "Инновационные молекулярно-цитогенетические технологии в педиатрии".
Область научных интересов Берешевой А.К. - генетика, медицинская цитогенетика, хромосомные аномалии при аутизме, недифференцированных формах умственной отсталости, у супружеских пар с нарушением репродуктивной функции, включая изучение редких хромосомных вариантов и их связи с нарушением репродуктивной функции.
С 2009 года по настоящее время Берешева А.К., совмещает свою основную работу, являясь руководителем клинических ординаторов и аспирантов института. Принимает активное участие в подготовке и проведении научно-практических конференций и всех 11-ти ежегодных конгрессов института "Современные технологии в педиатрии и детской хирургии".
Индекс Хирша - 6.

Е.С. Воздвиженская

Воздвиженская Екатерина Сергеевна - старший научный сотрудник, кандидат биологических наук по специальности "биохимия".
В институте работает с 1977 года, сначала в лабораторной группе отдела анестезиологии и реаниматологии, затем в лаборатории клинической хирургической биохимии, лаборатории патологии обмена веществ, с 2001 года в НИЛ общей патологии. В 1988 году защитила кандидатскую диссертацию на тему "Значение биологически активных метаболитов фосфолипидов в реакциях асептического воспаления".
Основным научным направлением работы в настоящее время является изучение лабораторных маркеров прогрессирования поражения миокарда при кардиомиопатиях: оценка диагностической эффективности определения маркеров повреждения миокарда, маркеров эндотелиальной дисфункции, нейрогуморальных маркеров, уровней мозгового, предсердного и эндотелиального натрийуретических факторов, активатора и ингибитора активации плазминогена и др.
За время работы в лаборатории внесла существенный вклад в разработку и совершенствование методов клинической биохимии для диагностики заболеваний детского возраста. Является квалифицированным биохимиком, владеющим современными биохимическими методами исследования и экспериментальной техникой. Это общие клинико-биохимические методы и специальные методы исследования, высокочувствительный высокоспецифичный метод ELISA (иммунно-ферментное определение с различными типами детекции), работает на биохимических анализаторах. За последние 5 лет опубликовано 25 печатных работ.
Индекс Хирша - 4.

Т.С. Окунева

Окунева Татьяна Сергеевна - старший научный сотрудник, образование высшее биологическое.
В 1976 году закончила Калининский государственный университет. В институте работает с 1996 года; с 1996 года в лаборатории клинической мембранологии, с 1998 года в лаборатории клинической биохимии, а с 2001 года в лаборатории общей патологии.
Окунева Т.С. проводит исследования по темам: "Разработка современных методов и критериев диагностики хронических заболеваний легких у детей, принципов их патогенетической терапии" и "Новые методы ранней диагностики и превентивного лечения атопических заболеваний". Она принимала участие в решении следующих научных проблем: определение роли различных видов сенсибилизации к грибковым аллергенам у детей с аллергическими бронхолегочными заболеваниями и разработка лабораторных критериев прогрессирования аллергических заболеваний. С её участием были разработаны 2 медицинские технологии: "Диагностика грибковой сенсибилизации у детей с аллергическими заболеваниями лёгких" и "Дифференцированная диетотерапия детей, страдающих атопическим дерматитом". Основным научным направлением работы Окуневой Т.С. в настоящее время является изучение роли рекомбинантных и растительных аллергенов в развитии аллергических процессов.
Окунева Т.С. владеет рядом биохимических методов исследования. В последние годы освоила так же высокочувствительный и высокоспецифичный метод Immuno Cap, позволяющий дать количественную оценку широкого спектра специфических IgE и IgG-антител, а также ряда маркеров аутоиммунных заболеваний.
Окуневой Т.С. опубликовано в соавторстве 56 печатных работ, в том числе 3- в зарубежной печати, 2 главы в монографиях, 15 статей.
За многолетний добросовестный труд в 2005 году была награждена почетной грамотой Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации.

И.В. Золкина

Золкина Ирина Вячеславовна - старший научный сотрудник, кандидат биологических наук по специальности "фармакология, клиническая фармакология - 14.00.25".
В 2003 г. закончила Московскую Государственную Академию ветеринарной медицины и биотехнологии им. К.И. Скрябина, ветеринарно-биологический факультет, по специальности биохимия. С 2003 по 2008 гг. работала лаборантом-исследователем, а затем младшим научным сотрудником в ММА им. И.М. Сеченова, в лаборатории клинической фармакологии при кафедре Клинической фармакологии и пропедевтики внутренних болезней на лечебном факультете. С 2008 г. по настоящее время старший научный сотрудник НИЛ общей патологии МНИИ педиатрии и детской хирургии.
Опубликовано 25 публикаций, в том числе 1 - методическое пособие для врачей, 2 новые медицинские технологии, 9 статeй в научных журналах, рекомендованных ВАК.
В НИЛ общей патологии Золкина И.В. работает в области диагностики нарушений обмена веществ у детей, с помощью хромато-масс спектрометрии. С ее участием, были внедрены следующие высоко-технологичные методы исследования нарушений обмена: определение аминокислот и ацилкарнитинов, пуринов и пиримидинов, терапевтический лекарственный мониторинг. В настоящее время Золкина И.В. принимает активное участие в разработке методик по определению стероидных гормонов и витаминов хроматографическими методами.

Е.И. Шабельникова

Шабельникова Екатерина Игоревна - старший научный сотрудник, кандидат медицинских наук.
Шабельникова Е.И. окончила медико-биологический факультет, отделение биохимии РГМУ им. Н.И.Пирогова в 2001 году. С 2001 г. работает в НИЛ общей патологии Московского НИИ педиатрии и детской хирургии Минздрава России. В 2005 г. защитила диссертацию на тему: "Морфо-функциональные характеристики митохондрий лимфоцитов у детей при различных формах недостаточности клеточного энергообмена", по специальностям "гистология, цитология, клеточная биология" и "клиническая лабораторная диагностика". Прошла первичную переподготовку и окончила курсы повышения квалификации по специальности "Клиническая лабораторная диагностика". Имеет 6 патентов на изобретение.
Основное научное направление - разработка проблемы цитологической диагностики и патогенеза детских болезней, обусловленных первичной и вторичной недостаточностью клеточной энергетики (дисфункции митохондрий).
С 2005 г. по 2008 г. являлась заведующей редакцией журнала "Вестник педиатрической фармакологии и нутрициологии".
Принимает активное участие в организации и проведении научных форумов, являлась ответственным секретарем конференций, проводимых НИЛ общей патологии института.

А.В. Семенов

Семёнов Алексей Владимирович - старший научный сотрудник, кандидат медицинских наук.
В институте работает с 1987 г. (лаборатория иммунологии и иммунохимии, лаборатория иммунологии и клинической патоморфологии, НИЛ общей патологии).
Дисертационная работа "Управление анафилактическими реакциями в эксперименте путем блокирования работы цитослетета" посвящена возможности подавления системной анафилактической реакции препаратаи, воздействующими на цитоскелет (актиновые филаменты). Показана высокая эффективность как препаратов группы цитохалазинов (цитохалазины Б и Д), так и вновь синтезированных препаратов - производных индола блокировать выброс медиаторов клетками периферической крови, а также развитие системной анафилактической реакции морских свинок и их смерть в эксперименте in vivo.
Семенов А.В. владеет более чем 20 иммунологическими методиками. За последнее время освоены высокотехнологические методы хемилюминесцентного анализа клеток крови, иммуногистохимического исследования, метод оценки клеточного энергообмена путем определения активности митохондриальных и цитоплазматических ферментов (СДГ, ?-ГФДГ, ГДГ, ЛДГ), методики компьютеризированной хемилюминесценции и метод определения сенсибилизации к аллергенам с применением прибора "ImmunoCap".
Область научных интересов: изучение функционального состояния иммунокомпетентных клеток при различных заболеваниях; изучение состояния биоэнергетического обеспечения фагоцитирующих нейтрофилов у детей с транзиторной и вторичной митохондриальной недостаточностью.
За 5 лет опубликовано 17 работ.

П.А. Шаталов

Шаталов Петр Алексеевич - научный сотрудник
В НИЛ общей патологии работает с июня 2010 года. В 2012 году апробирована диссертационная работа на соискание ученой степени к.б.н. "Гистологические характеристики скелетно-мышечной ткани человека при врожденной миопатии центрального стержня". Опубликовано 10 печатных работ.
Владеет следующими методами: светооптическими, электронномикроскопическими, ферментогистохимическими, иммуногистохимическими, в настоящее время активно осваивает методы молекулярной генетики.
Область научных интересов: гистология, молекулярная биология, эмбриология, генетика.

Е.А. Рогожникова

Рогожникова Елена Александровна - фельдшер-лаборант, имеет высшую квалификационную категорию. В институте работает 17 лет.
Владеет следующими методами: подготовка свежезамороженных и парафиновых срезов для световой микроскопии, в том числе для иммуногистохимических методов, различные методы окрашивания срезов, включая сложные гистохимические и гистоферментохимические реакции; проведение цитохимических реакций, осмирование и заливка материала в эпоксидные смолы для электронной микроскопии.
Награждена почетной грамотой Министерства здравоохранения Российской Федерации за многолетний добросовестный труд.

Е.А. Климова

Климова Елена Александровна - лаборант, в НИЛ общей патологии института работает 16 лет.
Владеет следующими методами: подготовка свежезамороженных и парафиновых срезов для световой микроскопии, в том числе для иммуногистохимических методов, различные методы окрашивания срезов, включая сложные гистохимические и гистоферментохимические реакции; проведение цитохимических реакций, осмирование и заливка материала в эпоксидные смолы для электронной микроскопии.